一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠滑膜成纤维细胞(Mouse Synovial Fibroblasts)
细胞别称:MSF;滑膜细胞;关节滑膜成纤维细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,无关节炎症或代谢性疾病史)
组织来源:膝关节滑膜组织(经胶原酶消化法分离)
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质包被培养器皿)
细胞形态:典型长梭形或纺锤状,汇合后呈平行排列
细胞代数:P3 - P8(保证细胞增殖活性与功能稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:高糖DMEM(含10% FBS+1%双抗+成纤维细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(依赖血清浓度与细胞密度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
避免机械吹打过度(防止细胞外基质蛋白流失)
首次换液需在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:高糖DMEM基础液(含20% FBS+10% DMSO)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
胰酶消化后离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(标准≥90%)
功能验证:胶原分泌检测(P5代细胞应维持ECM合成能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)
2. 到货48小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
3. 复苏存活率低于85%(经第三方检测确认)
4. 种属鉴定结果与描述不符
不予重发情形:
1. 客户未在24小时内启动复苏流程
2. 自行更换培养基导致细胞表型改变
3. 反复冻融或不当操作引发细胞损伤
4. 未按规范进行细胞身份鉴定即进行后续实验