一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠软骨细胞（Mouse Chondrocytes）
- 细胞别称：软骨细胞；关节软骨细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：1 - 3周龄健康小鼠（性别不限，供体无关节疾病史）
- 组织来源：关节软骨或肋软骨组织
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：多角形或梭形，单层贴壁后呈典型软骨细胞样聚集
- 细胞代数：P2 - P6（维持表型稳定及基质分泌能力）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：高糖DMEM/F12（含10% FBS+1%双抗+50μg/mL抗坏血酸）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约72 - 96小时（与软骨分化状态相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内植入
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后离心去冻存液，加2mL培养基重悬。
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱4小时待细胞贴壁。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（避免过度融合导致去分化）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）。
- 37℃消化5 - 8分钟，轻拍瓶壁至细胞脱落。
- 注意事项：
- 消化后需离心去除酶残留（300g×5分钟）。
- 传代后48小时内避免换液以保护新分泌的细胞外基质。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 细胞悬液与冻存液按1:1混合。
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：Ⅱ型胶原免疫荧光染色（P3代细胞阳性率＞90%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞团碎裂（需提供物流温度曲线）。
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供无菌检测报告）。
- 细胞存活率低于80%（经第三方检测确认）。
- 胶原蛋白分泌能力未达标准（需提供阿尔新蓝染色结果）。
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养皿导致细胞贴壁失败。
- 传代时机械刮取替代酶消化造成物理损伤。
- 长期传代超过P6导致细胞去分化。
- 未按规范进行抗坏血酸补充影响基质合成。
