一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠骨细胞(Mouse Osteocytes)
- 细胞别称:骨细胞;骨基质细胞;成骨细胞(需根据分化阶段区分)
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别可选,需注明供体周龄)
- 组织来源:骨组织(分离自股骨或胫骨骨基质)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或多突状,成熟后呈现星状分支结构
- 细胞代数:P2 - P6(建议使用前3代以确保成骨分化潜能)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:α - MEM基础培养基(含10% FBS+1%双抗+50μg/mL抗坏血酸)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清),液氮长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(受分化状态及培养基成分影响)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体移植或临床相关实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预温培养基;培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(避免过度融合导致自发矿化)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,通过轻柔吹打分离细胞,显微镜下确认单细胞悬液形成
- 注意事项:添加β - 甘油磷酸盐可诱导成骨分化;钙沉积实验前需更换为矿化诱导培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含20% FBS+10% DMSO的α - MEM培养基
- 细胞密度:推荐冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:消化后离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀,分装至冻存管后程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮储存
- 复苏验证:存活率≥85%(台盼蓝染色法);分化能力验证:碱性磷酸酶染色阳性率>90%
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 到货时干冰完全挥发且细胞存活率<80%;2. 72小时内经qPCR证实支原体污染;3. 细胞STR鉴定与数据库不匹配
- 不予重发情形:1. 未按推荐方法进行传代或冻存操作;2. 使用非指定诱导剂导致异常分化;3. 培养超过建议代数后出现功能衰退;4. 未保留原始包装及温度监控记录