一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠附睾上皮细胞
细胞别称:附睾上皮细胞;附睾管上皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年雄性小鼠(供体无生殖系统疾病史)
组织来源:附睾组织
生长特性:贴壁生长(依赖基底膜基质成分)
细胞形态:单层铺展呈立方状或柱状,接触抑制后排列紧密
细胞代数:P3 - P8(维持上皮细胞极性及分泌功能)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:上皮细胞专用培养基(含5% FBS+上皮生长因子及激素添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖激素微环境及接种密度)
供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
・冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预热培养基轻柔混匀
・培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡温湿度
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:4(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
・使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙离子螯合剂)
・37℃消化30 - 60秒,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项:
・消化后轻柔吹打避免损伤微绒毛结构
・传代后12小时内补充5μg/mL胰岛素类似物
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
・离心后重悬细胞于预冷冻存液
・程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 1小时→ - 80℃过夜→液氮长期存储
复苏验证:
・复苏后12小时台盼蓝染色存活率≥90%
・功能验证:免疫荧光检测紧密连接蛋白ZO - 1表达(P5代细胞应保持完整单层屏障)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录仪显示超温导致细胞失活
2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
3. 复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝检测视频)
4. 物种鉴定结果与标识不符
不予重发情形:
1. 未使用配套培养基导致细胞去分化
2. 超时传代(代数超过P8仍要求质保)
3. 自行修改冻存程序造成冰晶损伤
4. 未按手册进行周期性消化酶活性校准
(注:本产品需配合专用细胞外基质包被培养器皿使用,实验前请详阅技术手册附录的激素响应测试方案)