一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠子宫内膜基质细胞(Mouse Endometrial Stromal Cells)
- 细胞别称:MESCs;子宫内膜基质细胞;子宫基质细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:雌性成年小鼠(健康无生殖系统疾病,周龄8 - 12周)
- 组织来源:子宫内膜基质层(分离自动情周期特定阶段)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:梭形或星形,贴壁后呈纤维状延展,融合后形成网状结构
- 细胞代数:P3 - P8(保持激素响应及分化潜能)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10%胎牛血清+1%双抗+β - 雌二醇及孕酮添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 增殖特性:激素依赖性增殖(建议添加17β - 雌二醇模拟生理环境)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于37℃培养箱,静置4小时后首次换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 85%(避免过度融合导致自发分化)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶辅助消化),37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
- 注意事项:传代后48小时内避免激素处理以维持细胞稳态,培养全程需避光保存激素添加剂
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础冻存液(含90%胎牛血清+10% DMSO)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后执行梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃ 12小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法),功能验证:免疫荧光检测波形蛋白(Vimentin)阳性率>95%
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
- 72小时内证实微生物污染(需提供污染样本检测结果)
- 细胞标志物检测与描述不符(需提供流式检测数据)
- 不予重发情形:
- 未按推荐方法进行胶原包被导致贴壁失败
- 自行修改激素添加剂配比引发细胞异常分化
- 解冻后未进行梯度离心直接接种
- 超过说明书标注的最长传代代数仍要求质保
(注:所有操作需遵守实验室生物安全规范,建议使用原代细胞专用培养耗材)