一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠子宫成纤维细胞(Mouse Uterine Fibroblasts)
- 细胞别称:子宫基质细胞;子宫成纤维样细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年雌鼠(无生殖系统疾病史)
- 组织来源:子宫组织(经胶原酶消化分离)
- 生长特性:贴壁生长(依赖培养皿表面贴附)
- 细胞形态:典型长梭形或星状,呈成纤维样单层排列
- 细胞代数:P3 - P10(传代稳定性高,维持增殖活性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 1%双抗+ 成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖血清浓度与细胞密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面,静置培养箱4小时稳定贴壁
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 消化终止时加入含血清培养基中和酶活性
- 传代后12小时更换新鲜培养基以清除碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 细胞悬液与冻存液等体积混合
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:胶原分泌能力检测(P5代细胞分泌水平应达标)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 收到后48小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)
- 细胞种属鉴定与描述不符(需提供STR检测报告)
- 不予重发情形:
- 未按推荐条件培养导致细胞状态异常
- 自行改造培养基或添加未经验证的生长因子
- 冻存管反复冻融或保存温度不达标
- 未进行污染排查直接用于后续实验