小鼠睾丸间质细胞

小鼠原代细胞

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XM-X05015×10^5小鼠原代细胞4220


一、细胞基本属性

细胞名称:小鼠睾丸间质细胞(Mouse Leydig Cells)

细胞别称:睾丸间质细胞、Leydig细胞

种属来源:小鼠(Mus musculus)

年龄性别:健康成年雄性小鼠(供体无生殖系统疾病史)

组织来源:睾丸间质组织

生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)

细胞形态:多角形或星形,单层贴壁后呈现典型类上皮样结构

细胞代数:P3 - P8(维持睾酮分泌功能稳定)

细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:DMEM/F12+10%胎牛血清+1%双抗+睾酮前体物质(如孕烯醇酮)

培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

倍增时间:约48 - 72小时(受激素刺激影响显著)

供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或动物繁育


二、细胞培养操作指南

收货处理:

- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基

- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时

传代标准:细胞融合度达80%-90%(贴壁紧密时需及时传代)

传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)

消化方法:

- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)

- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落

注意事项:

- 消化终止需立即加入含血清培养基

- 首次传代后48小时内避免换液以保持激素分泌稳态


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)

细胞密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL(高密度维持细胞活性)

冻存步骤:

- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液

- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存

复苏验证:

- 复苏后12小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)

- 功能验证:ELISA检测睾酮分泌量(P5代细胞应保持基础分泌水平)


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供冷链记录)

2. 72小时内证实微生物污染(需提交污染检测报告)

3. 复苏存活率低于85%(需提供染色结果及显微照片)

4. 细胞特异性标志物(如3β - HSD)鉴定不达标

不予重发情形:

1. 未按推荐条件进行激素诱导培养

2. 使用非包被培养器皿导致贴壁失败

3. 细胞传代超过P10代后功能异常

4. 未执行规范冻存操作引发冰晶损伤

(注:所有操作需符合生物安全规范,细胞特性可能因个体差异存在正常生物学波动)