一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠乳腺成纤维细胞（Mouse Mammary Fibroblasts）
- 细胞别称：MMF；乳腺基质细胞；乳腺成纤维样细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年雌鼠（供体筛选无乳腺疾病史）
- 组织来源：乳腺基质组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白基质）
- 细胞形态：长梭形或星形，单层贴壁后呈网状排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性与遗传稳定性）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Fibroblast Growth Medium（含10% FBS+成纤维细胞特异性添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖细胞密度与培养基质）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于5mL预热培养基。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时平衡。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞间隙增大后终止。
- 注意事项：
- 避免机械刮取损伤细胞膜。
- 传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及营养保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管。
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（≥90%）。
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应保持基质合成活性）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控截图）。
- 5天内证实微生物污染（需提供培养污染检测图像）。
- 细胞贴壁率低于80%（需提供接种24小时显微照片）。
- 物种鉴定与描述不符。
- 不予重发情形：
- 解冻后超48小时未进行贴壁培养。
- 使用非推荐消化酶导致细胞损伤。
- 未按梯度降温直接冻存导致细胞破裂。
- 未进行无菌操作引发后续污染。
