一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠卵巢间质细胞(Mouse Ovarian Stromal Cells)
- 细胞别称:卵巢基质细胞;卵巢间质成纤维细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年雌鼠(周龄6 - 8周,SPF级)
- 组织来源:卵巢间质组织(经胶原酶消化法分离)
- 生长特性:贴壁生长(依赖基质胶包被培养器皿)
- 细胞形态:纺锤形或星形,贴壁后伸展呈成纤维样
- 细胞代数:P3 - P6(维持激素响应特性与分泌功能)
- 细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清替代型冻存液)
- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS + 1%双抗+ITS添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:程序降温冻存液(含10% DMSO及海藻糖),液氮长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(受血清批次及激素添加影响)
- 供应限制:仅限体外研究,不可用于体内移植或疾病模型构建
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒外壁,静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准:融合度达80% - 90%(接触抑制后需及时传代)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02% EDTA),37℃消化2 - 3分钟,轻柔拍打促进细胞脱离
- 注意事项
- 终止消化时加入含血清培养基(比例≥1:1)
- 传代后12小时补充50ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 10%海藻糖+20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀,程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证
- 存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:类固醇激素分泌检测(P4代细胞孕酮分泌量>20ng/10^6 cells/24h)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1.干冰耗尽导致细胞活性丧失(需提供物流温度记录)
- 2.到货48小时内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
- 3.细胞复苏存活率低于80%(经第三方检测确认)
- 4.物种鉴定与标识不符(STR检测结果偏差>3%)
- 不予重发情形
- 1.未按规范进行预包被处理导致细胞贴壁失败
- 2.擅自添加高浓度激素干扰细胞正常代谢
- 3.解冻后常温放置超过10分钟
- 4.未使用指定培养基引发细胞形态异常