一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠卵巢颗粒细胞（Mouse Ovarian Granulosa Cells）
细胞别称：卵巢颗粒细胞；卵泡颗粒细胞；MGC
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：健康成年雌鼠（周龄6 - 8周，无生殖系统疾病史）
组织来源：卵巢卵泡颗粒层（分离自窦前/窦状卵泡）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原包被培养器皿）
细胞形态：单层多角形或圆形，细胞核大且胞质丰富
细胞代数：P3 - P6（维持类固醇合成及受体表达功能）
细胞规格：5×10⁵ cells/T25胶原包被培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基：DMEM/F12 + 10% FBS + 1% ITS+Premix + 10 ng/mL FSH
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无动物源冻存液（含7.5% DMSO及海藻糖），液氮长期保存
倍增时间：约36 - 48小时（与激素刺激强度相关）
供应限制：仅用于基础研究，不可用于人类疾病模型构建
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴解冻后，离心去除冻存液，重悬于预热培养基
培养瓶：直接置于CO₂培养箱平衡1小时，24小时内首次换液
传代标准：融合度达80% - 90%（接触抑制后增殖速率显著下降）
传代比例：1:2分瓶（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA溶液预处理5分钟
37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
消化全程需含10% FBS培养基中和
传代后6小时补充1 nM雌二醇提升贴壁效率
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含胎牛血清替代物及抗氧化剂）
细胞密度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤：
预冷冻存管至4℃，细胞悬液分装后程序降温
梯度冷冻：4℃ 30min → - 20℃ 1h → - 80℃ 12h → 液氮储存
复苏验证：
复苏后12小时检测存活率（台盼蓝染色≥85%）
功能验证：孕酮分泌检测（P4代细胞FSH刺激后分泌量应＞50ng/10⁶ cells）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度曲线）
2. 48小时内证实真菌污染（需提供革兰氏染色图像）
3. 细胞贴壁率低于70%（复苏后12小时显微观察）
4. 物种鉴定PCR结果不符
不予重发情形：
1. 未使用胶原包被培养器皿导致细胞脱落
2. 自行添加未知浓度激素干扰细胞功能
3. 超过推荐代次（P6以上）的实验数据异常
4. 未执行定期支原体检测造成交叉污染
（注：所有操作需符合实验动物伦理规范，细胞分离过程遵循AAALAC认证标准）
