一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠海绵体平滑肌细胞(Mouse Corpus Cavernosum Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:CCSMC;海绵体平滑肌细胞;阴茎平滑肌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无泌尿生殖系统疾病史)
- 组织来源:阴茎海绵体组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质包被)
- 细胞形态:典型长梭形或纺锤形,融合后呈束状排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性及标志蛋白表达一致性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含10% FBS + 平滑肌细胞生长添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基混匀离心
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶辅助解离)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免机械吹打过度(防止肌丝结构损伤)
- 传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及能量代谢保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1.5小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色存活率≥90%
- 功能验证:钙离子荧光探针检测收缩功能(P5代细胞应保持钙响应活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供液氮罐温度记录)
- 到货3日内证实微生物污染(需提供PCR/培养检测结果)
- 细胞标志蛋白表达缺失(α - SMA、钙调蛋白免疫荧光验证)
- 种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形:
- 超72小时未进行复苏操作
- 使用非平滑肌专用培养基导致功能异常
- 自行改良冻存方法导致细胞损伤
- 未进行功能验证即用于药物筛选实验
(注:本产品需配合胶原包被培养器皿使用,细胞收缩功能检测建议传代后48小时进行)