小鼠睾丸支持细胞

小鼠原代细胞

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XM-X04885×10^5小鼠原代细胞3750


一、细胞基本属性

- 细胞名称:小鼠睾丸支持细胞(Mouse Sertoli Cells)

- 细胞别称:睾丸滋养细胞;生精小管支持细胞

- 种属来源:小鼠(Mus musculus)

- 年龄性别:健康幼年或成年雄性小鼠(供体筛选无生殖系统疾病史)

- 组织来源:睾丸组织生精小管

- 生长特性:贴壁生长(依赖层粘连蛋白或胶原包被培养器皿)

- 细胞形态:不规则多边形或长梭形,胞体延展,核仁明显

- 细胞代数:原代至P3代(建议使用早期传代细胞以保证功能活性)

- 细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含5% FBS + 1% ITS + 2mM谷氨酰胺)

- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

- 倍增时间:~72 - 96小时(原代细胞增殖能力有限,建议控制传代次数)

- 供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或药物开发


二、细胞培养操作指南

- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶经酒精擦拭后静置培养箱2小时再观察贴壁情况。

- 传代标准:细胞融合度达80%-90%(原代细胞建议每5 - 7天传代一次)。

- 传代比例:1:1至1:2(原代细胞建议高密度接种以维持活性)。

- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟,镜下观察到细胞间隙增大后立即用含血清培养基终止。

- 注意事项:避免剧烈吹打损伤细胞间连接结构;传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁。


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)。

- 细胞密度:冻存浓度建议为1×10^6 cells/mL。

- 冻存步骤:细胞消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管,按程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→长期存于液氮。

- 复苏验证:复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色法≥85%);功能验证包括免疫荧光染色(WT1或GATA4标志物表达检测)。


四、售后服务承诺

- 重发标准:

    - 运输过程中液氮罐泄漏或温度异常(需提供物流温度记录);

    - 到货72小时内经PCR证实支原体污染;

    - 细胞复苏存活率低于80%(需提供染色检测视频);

    - 物种鉴定结果与描述不符。

- 不予重发情形:

    - 未按推荐方法进行胶原包被导致细胞贴壁失败;

    - 自行更改培养基配方引发细胞功能异常;

    - 超低温保存设备故障导致反复冻融;

    - 未在传代前进行支原体筛查造成后续污染。