一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠肾上腺髓质细胞
- 细胞别称:肾上腺嗜铬细胞;肾上腺髓质嗜铬细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无内分泌疾病史)
- 组织来源:肾上腺髓质组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:类圆形或多角形,胞质内含嗜铬颗粒
- 细胞代数:P3 - P8(维持儿茶酚胺合成功能稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含5% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+神经生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂),-150℃液氮保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(依赖培养密度及神经生长因子浓度)
- 供应限制:仅供基础研究,不可用于临床应用或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶经75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
- 注意事项:
- 避免剧烈吹打防止嗜铬颗粒释放
- 传代后12小时需补充新鲜生长因子
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
- 细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(≥85%)
- 功能验证:儿茶酚胺荧光染色(P5代细胞应保持染色阳性率≥90%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供温度监控数据)
- 7日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后细胞存活率低于80%(台盼蓝染色法)
- 细胞特异性标志物检测未达标(TH染色阳性率<85%)
- 不予重发情形:
- 解冻后未按规范进行胶原包被培养
- 擅自更改培养基关键成分导致功能丧失
- 未使用指定离心参数造成机械损伤
- 超过建议代数(P8)仍要求质量保证
(注:所有操作需符合实验动物伦理规范,细胞特性可能受传代次数及培养条件影响,建议收到细胞后立即进行功能验证并留存记录)