一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肾上腺皮质细胞
细胞别称:肾上腺皮质细胞;肾上腺皮质类固醇生成细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体无内分泌疾病史)
组织来源:肾上腺皮质层(束状带与网状带)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:多角形或星形,胞质富含脂滴(光镜下可见折光颗粒)
细胞代数:P3 - P6(维持类固醇合成功能稳定性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:肾上腺皮质细胞专用培养基(含10% FBS+皮质细胞生长因子组合)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含7% DMSO及糖原保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约60 - 72小时(依赖激素刺激与培养密度)
供应限制:仅用于基础研究,不可用于药物筛选或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(避免过度生长导致功能衰退)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - 胶原酶复合消化液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱落
注意事项:
- 消化后需离心去除酶残留(300g离心5分钟)
- 培养初期添加1×胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂(ITS)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含7% DMSO+10%蔗糖)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ cells/mL(单管体积≤1.5mL)
冻存步骤:
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(标准≥85%)
- 功能验证:皮质酮基础分泌量检测(P4代细胞应≥50ng/10⁶ cells/24h)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏后活率低于85%(台盼蓝染色法)
4. 种属鉴定与标识不符
不予重发情形:
1. 未使用指定包被培养器皿导致贴壁失败
2. 自行添加地塞米松等激素干扰细胞功能
3. 未按时换液引发培养基酸化变质
4. 细胞培养超过推荐代数(P6)后功能异常
(注:本产品需配合专用培养基及包被试剂盒使用,操作前请详阅技术手册)