一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠颌下腺上皮细胞
细胞别称:SMGEC;颌下腺上皮细胞;唾液腺上皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无唾液腺疾病史)
组织来源:颌下腺组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
细胞形态:典型多角形或立方状单层,接触抑制后形成致密结构
细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含2% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与基质条件)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀离心去除冻存液后接种
- 培养瓶:75%酒精擦拭外壁,静置于培养箱2小时平衡温度与气体环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化1 - 3分钟,镜下观察细胞间隙增大后立即终止
注意事项:
- 避免机械吹打过度(防止细胞膜损伤)
- 传代后6小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:细胞角蛋白免疫荧光检测(P5代细胞应维持上皮特异性标志物表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰余量及温度记录)
2. 3天内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞复苏活力低于85%(台盼蓝染色法)
4. 物种鉴定与描述不符
不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过48小时
2. 自行更换培养基导致细胞功能异常
3. 未按规范进行消化传代(如过度消化或离心参数错误)
4. 未定期进行支原体检测引发实验污染
(注:以上内容基于标准操作流程,实际应用需结合具体实验条件优化)