一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠胸腺基质细胞
- 细胞别称:胸腺上皮细胞、胸腺间质细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体无胸腺相关疾病史)
- 组织来源:胸腺组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多边形或成纤维样,接触抑制后呈单层铺展
- 细胞代数:P3 - P8(维持胸腺微环境支持功能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS+成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(与胸腺上皮分化阶段相关)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每周传代1 - 2次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,终止后轻柔吹打至单细胞悬液
- 注意事项:
- 消化时添加含血清培养基终止反应
- 传代后48小时内避免频繁移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:流式检测MHC - II及CD80表达(P5代应保持基质细胞特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供温度监测数据)
- 7日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞贴壁率低于80%(需提供接种24小时显微照片)
- 细胞标志物表达与描述不符
- 不予重发情形:
- 使用非推荐包被基质(如未采用胶原蛋白预处理)
- 培养环境CO₂浓度长期偏离设定值
- 实验操作导致胸腺细胞共培养功能丧失
- 未按规范进行周期性传代导致细胞老化
- 注意:所有操作需遵守生物安全规范,细胞特性可能因个体差异存在批次间波动