一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠胸腺上皮细胞(Mouse Thymic Epithelial Cells)
- 细胞别称:MTEC;胸腺上皮细胞;胸腺基质细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康幼鼠(性别不限,供体筛选无免疫缺陷史)
- 组织来源:胸腺组织(经显微分离及酶消化富集)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
- 细胞形态:扁平多角形或铺路石样,形成连续单层结构
- 细胞代数:P2 - P6(维持胸腺上皮细胞特异性标志物表达)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:胸腺上皮细胞专用培养基(含5% FBS+表皮生长因子+胰岛素样生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~60 - 84小时(与细胞亚型及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒外壁,静置于培养箱4小时平衡微环境
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱离基质
- 注意事项
- 消化后需立即用含血清培养基终止反应
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以防细胞脱落
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:流式检测MHC - II及CD80表达(P3代细胞应保持免疫调控功能)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供温度监测截图)
- 到货7天内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
- 复苏存活率低于85%(按标准操作复测)
- 细胞标志物表达与说明书不符
- 不予重发情形
- 客户未按推荐传代比例导致细胞过度老化
- 使用非原装培养基或自行修改配方
- 未执行梯度降温直接冷冻细胞
- 实验操作污染导致细胞状态异常