一、细胞基本属性
1. 细胞名称:小鼠胰岛细胞(Mouse Islet Cells)
2. 细胞别称:胰岛β细胞;胰腺内分泌细胞;胰岛团簇细胞
3. 种属来源:小鼠(Mus musculus)
4. 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体无糖尿病史及代谢异常)
5. 组织来源:胰腺组织胰岛分离纯化
6. 生长特性:悬浮聚团生长(依赖细胞间黏附及基质支持)
7. 细胞形态:圆形或椭圆形细胞聚集成岛状结构,直径50 - 300μm
8. 细胞代数:P1 - P5(确保胰岛素分泌功能稳定性)
9. 细胞规格:500胰岛当量(IEQ)/冻存管(含专用冻存液)或1×10⁴活细胞/mL悬浮液
10. 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 1%青霉素/链霉素+11mM葡萄糖)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清胰岛专用冻存液(含7.5% DMSO及海藻糖),液氮长期保存
13. 倍增时间:不适用(原代细胞非增殖型)
14. 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于移植或体内实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预冷培养基
- 悬浮液:直接转移至培养皿,静置培养箱30分钟后补加1mL新鲜培养基
2. 传代标准:聚团结构松散或培养液pH值持续下降(通常维持7 - 10天)
3. 传代方法
- 轻柔吹打分散大团簇至50 - 150μm直径
- 使用细胞筛网过滤去除碎片,离心后重悬接种
4. 注意事项
- 全程操作避免剧烈震荡(保护细胞间连接)
- 更换培养基时保留50%原培养液(维持细胞自分泌因子)
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清胰岛冻存液(含7.5% DMSO + 0.25M海藻糖+羟乙基淀粉)
2. 冻存密度:100 - 200 IEQ/mL或1×10⁵活细胞/mL
3. 冻存步骤:梯度降温程序:4℃平衡30分钟 → -80℃冷冻盒过夜 → 液氮储存
4. 复苏验证
- 双硫腙染色鉴定胰岛纯度(≥90%为合格)
- 葡萄糖刺激实验:高糖条件下胰岛素分泌量应≥基础值3倍
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 1.运输温度记录异常导致细胞存活率<80%(需提供温度记录曲线)
- 2.48小时内证实细菌/真菌污染(需提供革兰氏染色证据)
- 3.胰岛素阳性率<70%(流式细胞术检测结果)
- 4.胰岛当量数量误差>15%
2. 免责条款
- 1.客户未使用指定离心参数导致团簇结构破坏
- 2.自行添加生长因子引发细胞去分化
- 3.未按标准进行葡萄糖响应性验证
- 4.解冻后超过6小时未进行功能检测