一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肾上皮细胞(Mouse Renal Epithelial Cells)
细胞别称:肾小管上皮细胞;肾脏上皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体经病理学筛查确认无肾脏病变)
组织来源:肾组织(优先分离肾皮质区近端小管上皮)
生长特性:贴壁依赖型(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:单层铺路石样排列,高密度时呈立方状或多边形
细胞代数:P3 - P10(推荐使用P4 - P7代进行功能实验)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含5% FBS +上皮细胞特化生长因子)
培养条件:恒温37℃环境,5% CO₂浓度维持,相对湿度≥90%
冻存条件:程序降温专用冻存管,液氮气相长期保存(-196℃)
倍增时间:约36 - 48小时(与细胞密度及培养基批次相关)
应用限制:仅供基础研究使用,禁止临床应用或转基因动物制备
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存细胞需37℃水浴振荡解冻,加入3mL预温培养基轻柔混悬
贴壁细胞培养瓶表面消毒后直接置入CO₂培养箱静置4小时
传代标准:融合度达80% - 85%时需及时传代(建议每2 - 3天操作)
传代比例:1:3至1:4分种(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方案:
采用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙离子螯合剂)
37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后即刻终止
关键提示:
严格控制消化时间防止紧密连接蛋白降解
首次换液应在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存制剂:无动物源成分冻存液(含7% DMSO及海藻糖稳定剂)
细胞密度:推荐冻存浓度5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
程序降温:
4℃平衡30分钟后移入冻存盒
梯度降温:-20℃(2小时)→-80℃(12小时)→液氮长期储存
质控检测:
复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
功能验证:钠钾ATP酶活性检测(P5代细胞应保持>85%基础活性)
四、售后服务承诺
质量保障:
1. 全程温度监控失效导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需第三方检测报告)
3. 细胞标志物表达异常(需提供流式检测原始数据)
免责条款:
1. 解冻后超48小时未进行贴壁培养
2. 自行改良培养基导致的增殖异常
3. 未按要求进行细胞基质包被
4. 实验人员操作失误造成的交叉污染