一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肾间质成纤维细胞
细胞别称:肾成纤维细胞;间质成纤维细胞;肾纤维母细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
组织来源:肾间质组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质贴附)
细胞形态:典型长梭形或不规则星形,单层铺展
细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10%FBS +生长因子添加剂)
培养条件:气相:5%CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度及生长因子活性)
供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
·冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
·培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
·使用0.25%胰蛋白酶-EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
·37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
·避免消化过度(防止细胞外基质蛋白降解)
·传代后12小时更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO及渗透保护剂)
细胞密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
·离心后轻柔重悬细胞于冻存液
·程序降温:4℃30分钟→-20℃1小时→-80℃过夜→液氮长期存储
复苏验证:
·复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
·功能验证:胶原分泌能力检测(P5代细胞应维持基质合成功能)
四、售后服务承诺
重发标准:
1.物流温度异常导致细胞死亡(需提供运输温度记录)
2.72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3.复苏存活率低于90%(台盼蓝染色法)
4.物种鉴定结果与不符
不予重发情形:
1.收货后超48小时未按规范复苏
2.使用非指定培养基或血清导致功能异常
3.反复冻融或不当操作致细胞损伤
4.未完成污染检测直接进行实验
(注:所有数据基于标准操作条件,实际应用需根据实验体系优化)