一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠前列腺成纤维细胞(Mouse Prostate Fibroblasts)
- 细胞别称:前列腺间质细胞;前列腺成纤维样细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年雄性小鼠(供体筛选无泌尿系统疾病史)
- 组织来源:前列腺组织间质层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或纺锤状,可呈放射状或漩涡状排列
- 细胞代数:P3 - P6(保证功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖血清浓度与细胞密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化30 - 60秒,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免消化过度(防止细胞外基质蛋白降解)
- 首次换液需在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 20min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时内检测细胞活力(台盼蓝染色存活率≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P3代细胞应维持肌成纤维细胞特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货3天内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色证据)
- 细胞种属鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
- 收到细胞后超72小时未进行复苏操作
- 自行更换培养基导致细胞形态异常
- 未按推荐方法进行胶原包被预处理
- 未执行标准支原体检测直接用于共培养实验