一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠膀胱平滑肌细胞(Mouse Bladder Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:BSMC;膀胱平滑肌细胞;膀胱SMC
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无泌尿系统疾病史)
- 组织来源:膀胱组织平滑肌层
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
- 细胞形态:典型长梭形或纺锤状,融合后呈束状排列
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+平滑肌细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解震,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭后静置培养箱2小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞收缩后终止
- 注意事项:
- 避免机械刮取损伤细胞(建议预冷PBS润洗)
- 传代后12小时更换培养基以去除残留消化酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光检测(P5代细胞应维持平滑肌标志物表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰包装照片)
- 3天内证实支原体/细菌污染(需提供PCR检测报告)
- 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)
- 种属鉴定与宣传不符
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非推荐培养基或添加非授权生长因子
- 反复冻融或不当操作导致细胞损伤
- 未按规范进行无菌检测即开展实验