一、细胞基本属性
1. 细胞名称：小鼠膀胱上皮细胞（Mouse Bladder Epithelial Cells）
2. 细胞别称：MBEC；膀胱上皮细胞；尿路上皮细胞
3. 种属来源：小鼠（Mus musculus）
4. 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体无泌尿系统疾病史）
5. 组织来源：膀胱黏膜层上皮组织
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原或纤维连接蛋白包被）
7. 细胞形态：铺路石状单层排列，融合后呈多角形或铺展扁平状
8. 细胞代数：P3 - P8（确保功能特性稳定及低传代变异）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：Epithelial Cell Medium（含2% FBS+上皮细胞生长因子及钙离子调节剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， -150℃以下长期保存
13. 倍增时间：约48 - 60小时（与细胞密度及基质包被相关）
14. 供应限制：仅限科学研究使用，不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱内平衡1小时
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 5天传代）
3. 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含钙离子螯合剂）
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
5. 注意事项
- 避免消化过度（防止紧密连接蛋白降解）
- 传代后12 - 24小时更换培养基以清除残余酶
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透平衡剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
- 功能验证：角蛋白免疫荧光染色确认上皮特性（P5代细胞需维持标志物表达）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货3天内确认细菌/真菌污染（需提供污染检测证据）
- 复苏后存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）
- 细胞种属鉴定与描述不符
2. 不予重发情形
- 细胞到货后未按规范立即处理（延迟复苏超48小时）
- 擅自更换培养基导致细胞形态异常或死亡
- 非标准冻存操作引起的细胞损伤
- 未定期检测支原体而引发后续实验污染
（注：所有操作需符合生物安全规范，建议定期进行支原体检测及STR鉴定。）
