一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肾足细胞(Mouse Renal Podocytes)
细胞别称:肾小球足细胞;肾足突细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体经肾功能筛查)
组织来源:肾小球足细胞层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:不规则星形或多角形,具备典型足突结构
细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数以保证功能稳定性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
培养基:足细胞条件培养基(含5% FBS及足细胞分化因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(依赖分化状态及培养条件)
供应限制:仅限科研使用,不可用于临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管接收后需37℃水浴快速解冻,加入3mL预热培养基轻柔混匀离心;培养瓶接收后酒精擦拭表面,静置于培养箱1小时稳定。
传代标准:细胞融合度达80% - 90%时传代(通常每5 - 7天一次)。
传代比例:推荐1:2至1:3分瓶(初始接种密度3×10³ cells/cm²)。
消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA轻消化,37℃孵育2 - 3分钟,显微镜下观察足突回缩后立即终止反应。
注意事项:避免频繁传代以维持分化表型;传代后48小时内更换培养基以去除细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)。
细胞密度:冻存浓度建议为1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL。
冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,分装至冻存管;梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 1小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
复苏验证:复苏后24小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%);功能验证需通过足细胞标志物(如Nephrin、Podocin)免疫荧光染色确认。
四、售后服务承诺
重发标准:运输过程温度异常(需提供物流温度记录);3日内证实支原体污染(需提供检测报告);细胞复苏活力低于85%;STR鉴定与描述不符。
不予重发情形:超时复苏(接收后超过48小时未处理);使用非指定培养基导致功能异常;自行修改冻存程序引发损伤;未按规范进行分化诱导实验。