一、细胞基本属性
1. 细胞名称:小鼠肾小球系膜细胞(Mouse Glomerular Mesangial Cells)
2. 细胞别称:Mesangial Cells;肾小球系膜细胞
3. 种属来源:小鼠(Mus musculus)
4. 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体无肾脏疾病史)
5. 组织来源:肾小球系膜区
6. 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
7. 细胞形态:长梭形或星形,融合后呈网状排列
8. 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与低传代变异)
9. 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS + 1%青霉素 - 链霉素 + 系膜细胞生长因子)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养基质与细胞密度)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精消毒表面,静置培养箱1小时适应环境
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)
3. 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化
5. 注意事项
- 避免过度消化(防止细胞膜损伤)
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 液氮长期保存
4. 复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持收缩蛋白表达)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 细胞复苏活力低于90%(台盼蓝染色法)
- 种属鉴定与标识不符
2. 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过72小时
- 使用非推荐培养基导致细胞功能异常
- 未按要求进行胶原包被导致贴壁失败
- 自行改造细胞后引发的状态异常