一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠肾小管上皮细胞(Mouse Renal Tubular Epithelial Cells)
- 细胞别称:mRTEC;肾小管上皮细胞;肾小管细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
- 组织来源:肾脏皮质区肾小管组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养皿)
- 细胞形态:单层铺展,接触抑制后呈立方状或多边形
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性和遗传一致性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:肾小管上皮细胞专用培养基(含2% FBS + 上皮生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖培养密度及基质包被条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入4mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后,静置于培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(常规每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化30 - 60秒,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项:
- 避免消化过度(防止紧密连接蛋白降解)
- 传代后12 - 24小时更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 转移至液氮
- 复苏验证:
- 复苏后24小时内台盼蓝染色检测存活率(≥90%为合格)
- 功能验证:细胞角蛋白18免疫荧光染色(P5代细胞应维持上皮特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)
- 收到后3日内证实微生物污染(需提供PCR检测结果)
- 复苏存活率低于90%(需提供台盼蓝染色结果)
- 物种鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非指定培养基或未进行基质包被
- 反复冻融或不当操作导致细胞损伤
- 未按规范进行支原体检测即开展实验