一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠腹腔巨噬细胞（Mouse Peritoneal Macrophages）
- 细胞别称：腹腔巨噬细胞；原代巨噬细胞；PMφ
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：6 - 8周龄健康成年鼠（性别可指定或混合提供）
- 组织来源：腹腔灌洗液（经无菌灌洗法分离）
- 生长特性：贴壁生长（需特定基质预处理培养器皿）
- 细胞形态：活化后呈不规则伸展状，静息状态为圆形或梭形，具有典型吞噬颗粒
- 细胞代数：原代细胞（P1 - P3，建议使用前两代以保证功能活性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：含10% FBS的DMEM高糖培养基（需添加20% L929条件培养基或10ng/mL M - CSF）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），- 150℃以下长期保存
- 功能特性：具有吞噬活性、炎症因子分泌能力及抗原呈递功能
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预温培养基。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时后换液。
- 传代标准：细胞密度达80% - 90%（原代细胞建议尽早使用，传代次数有限）
- 传代方法
- 使用细胞刮轻柔刮取贴壁细胞（或0.25% Trypsin - EDTA消化≤2分钟）
- 离心后按1:2比例接种于新培养器皿（推荐预铺多聚赖氨酸基质）
- 注意事项
- 避免频繁换液或机械损伤（巨噬细胞易激活或脱落）
- 活化实验前需静息培养≥24小时以恢复稳态
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 冻存密度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL（高密度冻存提升复苏存活率）
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液。
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：吞噬荧光微球实验（P2代细胞吞噬率应＞70%）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染样本检测图）
- 细胞复苏存活率低于80%（经第三方检测报告）
- 流式检测CD11b/F4/80双阳性率＜90%
- 不予重发情形
- 使用非推荐细胞因子（如GM - CSF替代M - CSF）
- 未按规定进行静息培养直接诱导活化
- 未使用预铺基质导致细胞贴壁失败
- 超过建议代数（P3）后功能下降
