一、细胞基本属性
1. 细胞名称：小鼠肠粘膜上皮细胞（Murine Intestinal Mucosal Epithelial Cells）
2. 细胞别称：IEC；肠上皮细胞；肠道粘膜上皮细胞
3. 种属来源：小鼠（Mus musculus）
4. 年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
5. 组织来源：小肠或结肠粘膜层（隐窝至绒毛区分离）
6. 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
7. 细胞形态：单层柱状或立方状，紧密连接排列
8. 细胞代数：P3 - P8（确保屏障功能与分化潜能）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：专用肠上皮培养基（含EGF、Noggin、R - spondin等生长因子）
11. 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~24 - 48小时（依赖隐窝干细胞比例）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴解冻后，立即加入5mL预冷培养基离心洗涤
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱1小时平衡温湿度
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（隐窝类器官需机械离散）
3. 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度1×10^4 cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含钙离子螯合剂）
- 37℃消化3 - 5分钟，离心后重悬于含Y - 27632抑制剂的培养基
5. 注意事项
- 维持低氧环境（3% O₂）可增强隐窝干细胞活性
- 避免频繁换液（建议每48小时更换50%培养基）
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
3. 冻存步骤
- 消化后离心收集，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后12小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：碱性磷酸酶活性检测（P3代细胞应保持分化潜力）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 72小时内证实微生物污染（需提供qPCR检测结果）
- 细胞活性低于85%（需提供复苏后显微影像）
- 基因型鉴定与品系不符
2. 不予重发情形
- 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
- 未添加Wnt信号通路激活剂影响类器官形成
- 超过推荐代数（P8）后功能异常
- 未按标准进行肠上皮特异性标记物（如Villin）验证
（注：所有操作需符合实验动物伦理规范，细胞分离过程已通过IACUC审核）
