一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肠道干细胞（Mouse Intestinal Stem Cells）
- 细胞别称：ISC；肠道隐窝干细胞；肠上皮干细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体经病原体检测合格）
- 组织来源：肠道隐窝基底区域（Crypt Base Columnar Cells）
- 生长特性：贴壁生长（需基质胶包被培养器皿）
- 细胞形态：单层或多层簇状，呈圆形或短梭形，可形成类器官结构
- 细胞代数：P3 - P8（维持干性标志物表达及增殖能力）
- 细胞规格：5×10^4 cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管（无血清冻存液）
- 培养基：Intestinal Stem Cell Medium（含B27、EGF、Noggin、R - spondin等添加因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖能力：可形成类器官并持续传代（需Wnt3a及Notch信号通路激活）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：类器官直径达100 - 200μm或单层融合度80% - 90%
- 传代比例：1:2至1:3（机械解离或酶消化后接种）
- 消化方法：
- 使用含1mg/mL Dispase的消化液
- 37℃孵育5 - 8分钟，轻柔吹打至类器官分散
- 注意事项：
- 避免频繁传代导致干性丢失（建议每5 - 7天传代）
- 基质胶包被需均匀，避免气泡影响贴附
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 收集类器官离心后重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：类器官形成效率（P5代应维持≥70%形成率）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 7天内证实支原体/真菌污染（需提供qPCR检测结果）
- 类器官形成能力低于60%（需提供培养第3天显微照片）
- 不予重发情形：
- 未使用推荐基质胶导致贴附失败
- 自行更改培养基成分引发分化异常
- 未按时更换培养基导致类器官坏死
- 未执行无菌操作造成污染
