一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肛门内括约肌平滑肌细胞（Mouse Internal Anal Sphincter Smooth Muscle Cells）
- 细胞别称：IAS SMC；肛门括约肌平滑肌细胞；肛管内括约肌细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成鼠（性别不限，供体筛选无消化系统疾病史）
- 组织来源：肛门内括约肌组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质及特定生长因子）
- 细胞形态：长梭形或纺锤状，融合后呈束状排列
- 细胞代数：P3 - P8（维持收缩功能与表型稳定性）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：平滑肌细胞专用培养基（含10% FBS+平滑肌细胞生长添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（与培养基成分及接种密度相关）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时恢复状态。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每4 - 5天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含Ca²⁺/Mg²⁺），37℃消化3 - 5分钟，镜下观察到细胞间隙增大后立即终止。
- 注意事项：避免机械刮取损伤细胞；消化后需离心去除残留酶；传代后48小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞，重悬于冻存液后分装至冻存管；梯度降温程序：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：复苏后48小时内检测细胞存活率（台盼蓝染色法≥90%）；功能验证：α - SMA免疫荧光染色确认平滑肌表型（P5代细胞阳性率≥95%）。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 到货3天内证实微生物污染（需提供检测报告）。
- 细胞复苏后活力低于90%（需提供台盼蓝染色证据）。
- 细胞标志物检测与描述不符（需提供实验数据）。
- 不予重发情形
- 解冻后超过48小时未进行接种操作。
- 使用非推荐培养基或添加剂导致功能异常。
- 未按标准流程进行传代或冻存引发细胞损伤。
- 未完成细胞复苏后基础验证直接开展实验。
