一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肠巨噬细胞
- 细胞别称：肠道巨噬细胞；肠组织固有层巨噬细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
- 组织来源：肠组织固有层（小肠或结肠）
- 生长特性：贴壁或半贴壁生长（依赖基质涂层）
- 细胞形态：圆形或阿米巴样，活化后呈不规则伸展形态
- 细胞代数：原代细胞（P0 - P3，建议传代不超过3次）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：巨噬细胞专用培养基（含10% FBS+ M - CSF/GM - CSF添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖激活状态与培养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时平衡温湿度
- 传代标准：细胞密度达80% - 90%（原代细胞建议每5 - 7天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用试剂：0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 操作方式：37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞悬浮
- 注意事项
- 避免机械损伤（巨噬细胞贴附力较弱）
- 首次传代后48小时内避免换液，以维持细胞活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色≥85%）
- 功能验证：吞噬荧光微球实验（P2代细胞吞噬率应≥70%）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货3天内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测图像）
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）
- 流式检测CD11b/F4/80标志物表达低于80%
- 不予重发情形
- 客户未按推荐条件培养（如未添加M - CSF/GM - CSF）
- 细胞保存超过72小时未复苏或冻存
- 实验操作不当导致功能丧失（如过度消化）
- 未进行污染排查直接用于共培养实验
