一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠腹膜间皮细胞(Mouse Peritoneal Mesothelial Cells)
- 细胞别称:MPMC;腹膜间皮细胞;腹腔间皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体筛选无腹腔疾病史)
- 组织来源:腹膜组织(壁层及脏层)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:单层铺展呈扁平多角形,汇合后呈现典型“铺路石样”排列
- 细胞代数:P3 - P6(推荐使用代数,保障功能活性与形态稳定性)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含血清替代型冻存液)
- 培养基:Mesothelial Cell Medium(含5% FBS+表皮生长因子+肝素)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无动物源冻存液(含7.5% DMSO+海藻糖),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(受细胞外基质包被质量影响)
- 供应限制:仅用于基础研究,禁止用于药物筛选或体内移植实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴轻柔摇晃解冻,加入3mL预热培养基离心洗涤
- 培养瓶:酒精擦拭表面后,静置培养箱4小时再更换培养基
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(高密度易诱发间质转化)
- 传代比例:1:2至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.02%胰酶 - EDTA溶液(含0.5mM Ca²⁺),37℃消化30 - 60秒,肉眼观察边缘卷曲立即终止
- 注意事项:
- 消化时保留少量血清培养基中和胰酶
- 传代后6小时需补充10ng/mL EGF以维持增殖活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含7.5% DMSO+1% BSA+葡萄糖)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃平衡20分钟 → 异丙醇冻存盒 - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后贴壁率≥85%(12小时观察)
- 功能验证:细胞角蛋白18免疫荧光染色(P3代应维持上皮表型)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 液氮罐运输温度记录异常(需提供温度监测曲线)
- 到货72小时内证实真菌污染(需提供革兰氏染色证据)
- 细胞活率低于85%(需提供台盼蓝染色显微照片)
- 种属鉴定结果与标识不符
- 不予重发情形:
- 未使用胶原包被培养器皿导致细胞脱落
- 自行添加TGF - β等因子诱导间质转化
- 解冻后离心转速超过300g造成机械损伤
- 未进行批次留样即开展大规模实验