一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肝卵圆细胞（Mouse Hepatic Oval Cells）
- 细胞别称：肝前体细胞；肝干细胞；肝脏祖细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无肝病及代谢异常史）
- 组织来源：肝脏组织（经胆管结扎或化学损伤诱导活化）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：纺锤形或类圆形，单层生长时呈簇状聚集
- 细胞代数：P3 - P6（维持干性特征及分化潜能）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：肝祖细胞专用培养基（含2% FBS+表皮生长因子+肝细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖能力：~72 - 96小时（依赖细胞活化状态及生长因子浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内移植实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入3mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应环境
- 传代标准：细胞融合度达70% - 80%（避免过度融合导致分化）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含1mM Ca²⁺）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞脱离基质
- 注意事项：
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
- 培养基需每48小时更换以维持干性因子活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 转入液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时内检测细胞活性（台盼蓝染色存活率≥85%）
- 功能验证：CK19及AFP免疫荧光染色确认干性标记物表达
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中液氮罐泄露或温度异常（需提供物流记录）
- 到货7天内经qPCR证实支原体污染
- 细胞活性低于80%（提供台盼蓝染色图像）
- 流式细胞术检测CD133/Oval - 6标志物表达缺失
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养皿导致细胞贴壁失败
- 自行添加分化诱导因子引发细胞状态改变
- 解冻后培养超过推荐代数（P6以上）
- 未执行定期支原体检测造成污染扩散
