一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠胃黏膜成纤维细胞(Mouse Gastric Mucosa Fibroblasts)
- 细胞别称:胃成纤维细胞;胃黏膜FIB;GMF
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无胃部疾病史)
- 组织来源:胃黏膜层(经机械分离与酶消化法提取)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型长梭形或星形,细胞质伸展明显
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖传代密度与培养条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后转移至含5mL培养基的离心管,离心去冻存液后重悬接种。
- 培养瓶:酒精消毒外表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液。
- 37℃消化30秒 - 1分钟,轻拍瓶壁使细胞脱落。
- 注意事项:
- 消化终止需立即加入含血清培养基。
- 首次换液建议在传代后12小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 冻存密度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管。
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存。
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:胶原分泌能力检测(P5代细胞应维持活性)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证明)。
- 72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染样本检测结果)。
- 细胞复苏存活率低于85%。
- 种属鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形:
- 客户未按规范解冻或延迟复苏超过48小时。
- 使用非指定培养基导致细胞功能异常。
- 自行修改冻存条件导致细胞损伤。
- 未执行支原体检测直接用于共培养实验。
(注:以上内容严格基于科研级细胞产品标准制定,操作需符合生物安全规范。)