一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肝成纤维细胞（Mouse Liver Fibroblasts）
- 细胞别称：肝间质细胞；肝星状细胞；肝成纤维样细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
- 组织来源：肝脏组织间质区域
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质附着）
- 细胞形态：长梭形或星状，单层贴壁后呈网状或放射状排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性与低传代变异）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48-72小时（依赖培养密度与血清批次）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀离心
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80%-90%（通常每2-3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶-EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化2-3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止
- 注意事项：
- 避免过度消化导致细胞膜损伤（可预铺明胶增强贴壁）
- 传代后12小时更换培养基以清除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶-3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色存活率≥90%
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞应表达特征性标志物）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货48小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 细胞复苏活力低于90%（台盼蓝染色法）
- 种属鉴定结果与描述不符（需提供STR报告）
- 不予重发情形：
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非推荐培养基或血清导致细胞异常
- 未按规范进行传代（如机械刮取代替消化）
- 未定期检测支原体引发交叉污染
