一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠结肠神经元细胞
- 细胞别称:Mouse Colon Neuronal Cells;结肠神经细胞;肠神经元
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:结肠组织神经丛(肌间神经丛与黏膜下神经丛)
- 生长特性:贴壁生长(需多聚赖氨酸或层粘连蛋白基质包被)
- 细胞形态:典型多极神经元形态,轴突与树突延伸明显,可形成神经网络连接
- 细胞代数:P3 - P8(保证神经元电生理活性与突触功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:神经细胞专用培养基(含2% B27添加剂+神经生长因子+谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及神经营养保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(神经元增殖能力有限,建议低密度传代)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱1小时平衡后换液
- 传代标准:细胞密度达70% - 80%(避免过度融合导致自发分化)
- 传代比例:1:2(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶辅助解离),37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞悬浮
- 注意事项:终止消化后需离心去除酶残留,避免损伤神经元突触结构;培养全程需添加神经保护剂(如抗氧化剂及凋亡抑制剂)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清神经细胞专用冻存液(含10% DMSO+神经营养因子)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬,分装至冻存管;程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后48小时检测活性(钙离子成像示踪电生理活性);功能验证:免疫荧光检测β - III tubulin及NeuN特异性表达
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度超限导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 7天内证实支原体/真菌污染(需提供荧光定量PCR报告)
- 神经元特异性标记物表达率低于90%(免疫荧光检测)
- 不予重发情形:
- 未使用专用基质包被培养器皿
- 培养环境CO₂浓度异常(<3%或>7%)
- 擅自添加非推荐生长因子导致细胞异常分化
- 未按要求进行周期性电生理活性监测
(注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,细胞特性可能因个体差异存在批次间微小波动)