一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠肝Kupffer细胞
细胞别称：肝巨噬细胞；肝脏定居巨噬细胞
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体无肝脏疾病史）
组织来源：肝脏组织门静脉区分离
生长特性：贴壁生长（依赖特定细胞因子及基质包被）
细胞形态：不规则星形或梭形，具有伪足伸展特征
细胞代数：原代细胞传代至P2 - P5（建议使用早期代次保持功能活性）
细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基：巨噬细胞专用培养基（含10% FBS + M - CSF因子添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及糖原保护剂）， - 150℃以下长期保存
增殖特性：有限增殖能力，建议每代接种密度≥1×10^4 cells/cm²
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
·冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
·培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱4小时待细胞贴壁
传代标准：细胞密度达80% - 90%或出现活化聚集现象
传代比例：1:1至1:2（维持高密度培养利于功能稳定）
消化方法：
·使用细胞刮轻柔机械分离或低浓度胶原酶消化（37℃处理5 - 8分钟）
·终止消化后离心收集，避免剧烈吹打
注意事项：
·避免频繁传代（原代细胞体外存活周期约2 - 3周）
·定期添加脂多糖（LPS）刺激维持吞噬功能
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：专用无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
细胞密度：冻存浓度1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
冻存步骤：
·消化后离心去上清，缓慢滴加冻存液重悬
·程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证：
·复苏后12小时检测吞噬荧光微球能力（阳性率应≥80%）
·流式检测表面标志物：F4/80+ CD11b+
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度曲线）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供检测证据）
3. 复苏存活率低于80%（台盼蓝染色或荧光活死染色）
4. 表面标志物鉴定结果不符
不予重发情形：
1. 收货后未立即处理导致细胞失活
2. 使用非巨噬细胞专用培养基培养
3. 传代次数超过P5代后功能退化
4. 未按要求进行定期支原体检测
注：所有操作需符合生物安全二级实验室规范，建议培养时添加1%青霉素 - 链霉素双抗溶液
