一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肝窦内皮细胞（Mouse Liver Sinusoidal Endothelial Cells）
- 细胞别称：LSEC；肝窦内皮细胞；肝血窦内皮细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，无肝脏疾病史）
- 组织来源：肝脏组织肝窦区域
- 生长特性：贴壁生长（需基质胶或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：扁平梭形或多边形，单层铺展后呈筛孔状结构
- 细胞代数：P3 - P6（维持窗孔结构及功能特性）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：肝窦内皮细胞专用培养基（含5% FBS+肝细胞生长因子补充剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约60 - 84小时（受细胞密度及基质影响）
- 供应限制：仅限基础研究使用，禁止临床应用或转基因操作
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管需37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶经酒精消毒后静置2小时再移入培养箱。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每4 - 5天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，镜下确认细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：避免剧烈吹打损伤窗孔结构；传代后48小时内避免频繁观察以维持细胞极性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：专用无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖）。
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后缓慢加入冻存液混匀，分装至冻存管；程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存。
- 复苏验证：复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）；功能验证需通过FITC - dextran吞噬实验检测窗孔活性。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 7天内证实支原体污染（需第三方检测报告）。
- 细胞纯度低于95%（CD31免疫荧光验证）。
- 细胞遗传背景与申报不符。
- 不予重发情形：
- 未按标准流程进行预包被处理。
- 使用非配套培养基导致功能丧失。
- 反复冻融超过2次。
- 未执行定期支原体预防性检测。
