一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肝实质细胞（Mouse Hepatocytes）
- 细胞别称：肝细胞；原代肝细胞；肝实质细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无肝病及代谢异常史）
- 组织来源：肝脏组织实质区域
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：多边形或立方形，形成紧密连接的细胞岛，胞质富含颗粒
- 细胞代数：原代细胞（P0）或低传代（P1 - P3），推荐使用前3代
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25胶原包被培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：肝细胞专用培养基（含10% FBS+肝细胞生长因子及L -谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：原代细胞增殖能力有限，体外培养周期建议不超过7天
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物量产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（原代细胞建议传代间隔≤72小时）
- 传代比例：1:2至1:3（胶原酶消化后按5×10⁴ cells/cm²密度接种）
- 消化方法：使用0.25%胶原酶IV型消化液，37℃孵育10 - 15分钟，轻柔吹打至细胞离散，离心后弃消化液并重悬于新鲜培养基
- 注意事项：避免机械力损伤（维持肝细胞极性结构）；培养24小时内需补充肝细胞特异性添加剂（如地塞米松、胰岛素）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS+肝细胞保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL（高密度维持细胞间连接）
- 冻存步骤：消化后细胞离心去上清，缓慢加入预冷冻存液重悬，梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）；功能验证：48小时内需通过白蛋白分泌或CYP450酶活性检测
四、售后服务承诺
- 重发标准：1. 干冰运输期间温度记录异常导致细胞团块破裂；2. 到货48小时内经PCR证实细菌/真菌污染；3. 复苏后存活率低于承诺值（需提供台盼蓝染色视频）；4. 种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：1. 未使用胶原包被培养器皿导致细胞贴壁失败；2. 超低温冰箱断电导致冻存细胞反复冻融；3. 未在推荐时间内完成细胞功能验证实验；4. 自行修改培养基配方引发代谢异常
