一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠结肠成纤维细胞（Mouse Colon Fibroblasts）
- 细胞别称：Colon Fibroblasts；结肠间质细胞；肠道成纤维细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
- 组织来源：结肠组织间质层
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质及胶原包被）
- 细胞形态：长梭形或不规则星形，融合后呈平行或漩涡状排列
- 细胞代数：P2 - P6（保证增殖活性与功能稳定性）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖细胞密度及培养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加3mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免机械吹打过度（防止细胞碎片产生）
- 首次传代后建议48小时内更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO+20%胎牛血清）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥90%）
- 功能验证：胶原分泌检测（P3代细胞应具备Ⅰ型胶原分泌能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供温度记录证明）
- 5天内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
- 细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法）
- 细胞种属鉴定与描述不符
- 不予重发情形
- 客户未按推荐条件保存或延迟复苏超过48小时
- 使用非指定培养基导致功能异常
- 反复冻融或不当操作引起细胞损伤
- 未按要求进行无菌操作引发交叉污染
