一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠小肠成纤维细胞（Mouse Small Intestinal Fibroblasts）
- 细胞别称：肠道成纤维细胞；小肠基质细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
- 组织来源：小肠组织固有层（经胶原酶消化分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质贴附）
- 细胞形态：典型梭形或星状，形成网状结构，接触抑制后单层生长
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性和遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%双抗+成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养密度及血清批次）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱1 - 2小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶-EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 消化后需完全中和酶活性（避免残留影响贴壁）
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及营养保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时存活率≥95%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应维持基质合成活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 收货3天内证实微生物污染（需提供PCR或培养检测结果）
- 细胞复苏活力低于90%（经第三方检测报告）
- 细胞遗传背景鉴定与描述不符
- 不予重发情形：
- 未按规范进行细胞复苏或培养（如直接常温解冻）
- 使用非指定培养基导致功能异常
- 因反复冻融或不当操作导致细胞损伤
- 未提供完整污染证据即申请售后
