一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠小肠隐窝上皮细胞（Mouse Small Intestinal Crypt Epithelial Cells）
- 细胞别称：Intestinal Crypt Cells；小肠隐窝细胞；肠道干细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，无肠道疾病史）
- 组织来源：小肠隐窝组织（近端小肠分离）
- 生长特性：贴壁生长（需基质胶包被培养皿）
- 细胞形态：单层贴壁，呈柱状或立方状，隐窝样结构形成能力
- 细胞代数：P3 - P8（维持干细胞特性与分化潜能）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Crypt Culture Medium（含2% FBS+Wnt3a/R - spondin生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖Wnt信号通路活性）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱平衡1小时。
- 传代标准：细胞密度达80% - 90%或形成隐窝样结构（通常每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含5mM EDTA）。
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞间隙增大后终止。
- 注意事项：
- 避免过度消化（防止Lgr5+干细胞丢失）。
- 传代后12小时内更换培养基以维持隐窝增殖活性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管。
- 梯度降温：4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后活率≥90%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：类器官形成实验（P3代细胞应形成典型隐窝 - 绒毛结构）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 3天内证实支原体/真菌污染（需提供qPCR检测结果）。
- 细胞活率低于85%（台盼蓝染色法）。
- 基因型鉴定与描述不符。
- 不予重发情形：
- 收货后超72小时未按规范复苏。
- 使用非推荐培养基或未添加必需生长因子。
- 反复冻融导致细胞功能丧失。
- 未进行无菌检测直接用于共培养实验。
（注：所有操作需符合生物安全规范，建议定期检测干细胞标记物Lgr5及分化潜能。）
