一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠小肠黏膜上皮细胞(Mouse Small Intestinal Mucosal Epithelial Cells)
- 细胞别称:SIEC;小肠上皮细胞;肠道黏膜上皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:小肠黏膜层(隐窝至绒毛顶端)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:单层柱状或立方状,接触抑制后排列紧密
- 细胞代数:P3 - P10(确保功能活性与基因稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:专用肠道上皮细胞培养基(含5% FBS+EGF/TGF - β等生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),- 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖隐窝干细胞活性及培养条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后离心去除冻存液,加入预热培养基重悬。
- 培养瓶:75%酒精擦拭外壁,静置培养箱2小时平衡温湿度。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液)。
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙扩大后终止。
- 注意事项:
- 避免剧烈吹打(保护微绒毛结构完整性)。
- 传代后6小时更换培养基以去除死细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存。
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)。
- 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞应维持分化特性)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 48小时内证实真菌/细菌污染(需提供显微镜观察证据)。
- 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时影像)。
- 基因型鉴定与描述不符。
- 不予重发情形:
- 客户未按推荐方法进行胶原包被预处理。
- 培养过程中添加非指定生长因子导致功能异常。
- 反复冻融或长期超低温保存不当。
- 未进行定期支原体检测导致交叉污染。
(本产品信息基于标准实验条件,具体应用需结合研究目的优化操作流程)