一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠胃平滑肌细胞(Mouse Gastric Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:MGSMC;胃平滑肌细胞;胃肌层细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无胃肠道疾病史)
- 组织来源:胃组织肌层(平滑肌层)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或纺锤状,平行排列成束状结构
- 细胞代数:P3 - P6(确保收缩功能与细胞纯度)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+平滑肌细胞特异性添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~60 - 72小时(依赖培养密度与生长因子补充)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加3mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置于培养箱1小时适应环境
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,观察到细胞间隙增大后终止消化
- 注意事项:
- 避免剧烈吹打(保护细胞收缩蛋白完整性)
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 梯度降温:4℃ 20min → -20℃ 1.5h → -80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:钙离子荧光探针检测收缩能力(P4代细胞需维持基础钙信号响应)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证明)
- 7天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(经第三方检测确认)
- 种属鉴定与描述不符(需提供STR分析结果)
- 不予重发情形:
- 未按推荐方法进行胶原包被导致贴壁失败
- 使用非配套培养基或自行添加未经验证的生长因子
- 细胞培养过程中反复污染(非原发污染)
- 未在传代后48小时内反馈细胞状态问题
(注:所有操作需符合生物安全规范,实验废弃物按危险品标准处理。)