一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠食管成纤维细胞（Mouse Esophageal Fibroblasts）
- 细胞别称：Esophageal Fibroblasts；食管基质细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体筛选无消化道疾病史）
- 组织来源：食管组织中分离的成纤维细胞群
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或纺锤状，贴壁伸展后呈不规则分支状
- 细胞代数：P3 - P10（推荐使用代数以保证增殖活性与功能表型）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10%FBS+1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5%CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10%DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（与血清批次及培养密度相关）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴解冻后，1200rpm离心2分钟去除冻存液，重悬于预热培养基；培养瓶：酒精擦拭表面后直接置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：避免频繁观察扰动贴壁细胞，传代后12小时需补加新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20%FBS+10%DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞后缓慢加入冻存液混匀，程序降温盒分阶段降温至-80℃，24小时内转移至液氮
- 复苏验证：存活率≥90%（台盼蓝染色法），功能验证需检测胶原分泌能力（P5代细胞应保持Ⅰ型胶原阳性表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：1.运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）；2.到货72小时内证实污染（需提供污染检测图像）；3.细胞存活率低于85%；4.物种鉴定结果不符（需提供PCR检测证据）
- 不予重发情形：1.收货后未按规范立即处理（如冻存管未及时离心）；2.使用非推荐包被基质（如未采用胶原蛋白包被培养皿）；3.自行更改培养基血清浓度导致细胞老化；4.未进行定期支原体检测引发污染扩散
（注：以上操作均需在二级生物安全柜内完成，实验废弃物按生物危害品规范处理）
