一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠食管平滑肌细胞(Mouse Esophageal Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:MESMC;食管平滑肌细胞;食管肌层细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无食管疾病史)
- 组织来源:食管肌层组织(分离自食管中段平滑肌束)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形单极或多极结构,融合后呈束状平行排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保收缩功能稳定性及纯度)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含10% FBS +平滑肌生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(依赖培养基成分及细胞密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
- 注意事项:
- 消化后需立即加入含血清培养基终止反应
- 传代后6小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法,存活率≥90%)
- 功能验证:钙离子荧光标记检测收缩活性(P5代细胞应维持基础收缩功能)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供冻存管状态照片)
- 3天内证实支原体或细菌污染(需提供检测报告)
- 复苏后细胞活力低于85%(台盼蓝染色法确认)
- 种属鉴定结果与描述不符(需提供STR检测报告)
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非推荐培养基或未进行胶原包被
- 多次冻融导致细胞损伤
- 未按规范进行污染检测直接用于实验