一、细胞基本属性
细胞名称
小鼠食管上皮细胞（Mouse Esophageal Epithelial Cells）
细胞别称
MEC；食管上皮细胞；食管角化细胞
种属来源
小鼠（Mus musculus）
年龄性别
健康成年小鼠（性别不限，SPF级环境饲养）
组织来源
食管上皮组织（经显微分离获得）
生长特性
贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态
扁平多角形，形成连续单层后呈铺路石样排列
细胞代数
P3 - P6（维持角质化标志物表达特性）
细胞规格
5×10^4 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基
角质形成细胞无血清培养基（含Ca²⁺梯度调节剂及上皮生长因子）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无动物源冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂），液氮长期保存
倍增时间
约60 - 72小时（依赖细胞分化状态）
供应限制
仅限基础研究使用，不可用于药物开发或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，加入3mL预温培养基低速离心去冻存液；培养瓶：酒精消毒后置于CO₂培养箱平衡4小时再换液
传代标准
细胞融合度达80% - 85%（建议每周传代1 - 2次）
传代比例
1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）；37℃消化3 - 5分钟，通过倒置显微镜监测细胞边缘卷曲
注意事项
避免机械吹打损伤细胞紧密连接结构；传代后需添加10ng/mL表皮生长因子促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含5% DMSO+胎牛血清替代物）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
预冷冻存管至4℃，细胞悬液分装后程序降温；梯度冷冻：4℃ 1h → - 80℃ 24h → 液氮长期储存
复苏验证
复苏后48小时进行CK14免疫荧光鉴定（阳性率应≥90%）；功能验证：跨膜电阻检测（TEER值需符合上皮屏障标准）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 物流温度记录仪显示超温事件（需提供全程温度曲线）；2. 到货7日内经qPCR证实微生物污染；3. 细胞活性低于85%（Calcein - AM/PI双染法）；4. 物种鉴定与标识不符
不予重发情形
1. 未使用指定包被基质导致细胞脱落；2. 擅自添加分化诱导剂影响细胞特性；3. 超过建议代数仍继续传代使用；4. 未执行推荐的复苏后静默期（12小时）
