一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肾动脉内皮细胞
细胞别称:MRAREC;肾动脉内皮细胞;肾血管内皮细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
组织来源:肾动脉血管段
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
细胞形态:单层铺路石状排列,接触抑制后呈扁平多角形
细胞代数:P3 - P8(经功能验证的稳定代次)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Mouse Endothelial Cell Medium(含5% FBS+内皮特异性生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养密度正相关)
供应限制:仅供基础研究使用,禁止临床应用或生物移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴轻柔摇晃解冻,加入3mL预温培养基离心重悬
培养瓶:表面消毒后静置培养箱1小时再观察贴壁情况
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
采用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
37℃消化30 - 60秒,显微镜下确认细胞边缘回缩后终止
注意事项:
严格控制消化时间(避免VE - cadherin蛋白降解)
首次换液需在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含胎牛血清替代物及抗氧化剂)
细胞密度:推荐1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
4℃预冷15分钟后分装冻存管
程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 液氮长期存储
复苏验证:
复苏12小时后活率≥90%(吖啶橙/碘化丙啶双染法)
功能验证:CD31免疫荧光染色阳性率>98%
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流监控显示温度异常(需提供温控记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需实验室检测证明)
3. 细胞活性低于承诺标准(双盲法检测)
4. 物种鉴定结果不符
免责情形:
1. 未在48小时内启动复苏流程
2. 自行更改培养基成分导致功能异常
3. 违反无菌操作引发污染
4. 未按要求进行基质包被影响细胞贴壁