一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肾动脉平滑肌细胞(Mouse Renal Artery Smooth Muscle Cells)
细胞别称:RASMC;肾动脉平滑肌细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
组织来源:肾动脉中膜平滑肌层
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质及特定生长因子)
细胞形态:长梭形或纺锤状,融合后呈平行束状排列
细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性和遗传一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含10% FBS +平滑肌细胞生长添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度及生长因子浓度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基混匀离心后接种
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱2小时平衡后更换新鲜培养基
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项:
- 消化后轻柔吹打避免机械损伤
- 传代后12小时内观察贴壁情况,48小时后更换培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及血清替代保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持平滑肌标志物表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰融化证据)
2. 3天内证实支原体/细菌污染(需提供检测报告)
3. 细胞活力低于90%(台盼蓝染色法)
4. 种属鉴定与宣传不符
不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过48小时
2. 使用非推荐培养基或添加未经验证的生长因子
3. 反复冻融导致细胞损伤
4. 未按规范进行功能验证即开展实验