一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠大隐静脉内皮细胞(Mouse Saphenous Vein Endothelial Cells)
- 细胞别称:MSVEC;隐静脉内皮细胞;静脉内皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体经SPF级环境饲养)
- 组织来源:大隐静脉血管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:单层铺路石样排列,融合后呈扁平多角形
- 细胞代数:P3 - P6(确保功能稳定及低传代特性)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:Mouse Endothelial Cell Medium(含5% FBS+内皮特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无动物成分冻存液(含7.5% DMSO),液氮长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(与基质包被密度相关)
- 供应限制:仅用于基础研究,禁止转售或用于药物筛选
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管复苏:37℃水浴轻柔摇晃解冻,加入3mL预温培养基离心重悬
- 培养瓶运输:酒精擦拭外壁后静置30分钟再移入培养箱
- 传代标准:细胞融合度达80% - 85%(建议每2 - 3天观察状态)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化30 - 60秒,显微镜下确认细胞边缘回缩后终止
- 注意事项:
- 维持培养液pH 7.2 - 7.4以保持最佳状态
- 首次传代前需完成两次全量换液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含7.5% DMSO+海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后1000rpm离心5分钟收集细胞
- 程序降温:4℃平衡→ - 80℃过夜→液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏12小时后检测细胞贴壁率(标准≥85%)
- 功能验证:CD31免疫荧光染色(阳性率应>95%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货48小时内证实真菌污染(需提供镜检图像)
- 细胞存活率低于85%(台盼蓝染色复检)
- 种属鉴定结果不符
- 不予重发情形:
- 未使用原代专用培养基培养
- 自行更改消化酶浓度导致细胞损伤
- 培养环境CO₂浓度超过8%
- 未按要求进行细胞基质包被